靶點DLL3:從基礎(chǔ)研究到臨床轉(zhuǎn)化的進展匯總

       引言

       NENs治療現(xiàn)狀

       神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤（NENs）起源于彌漫神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的罕見惡性腫瘤，主要位于胃腸道、胰腺和支氣管肺樹。其診斷依賴實驗室檢查、臨床檢查、影像學(xué)和功能研究，組織學(xué)和免疫組化是金標準。治療方法多樣，但缺乏預(yù)測生物標志物，治療方案依患者個體情況而定。

       DLL3在NENs中的作用

       DLL3在多種NENs中過表達，可作為潛在診斷靶點。分子成像研究顯示，以DLL3為靶點的免疫PET掃描在檢測SCLC和NEPC腫瘤及轉(zhuǎn)移灶方面有潛力。

       DLL3的結(jié)構(gòu)概述

       DLL3的結(jié)構(gòu)

       Delta-likeprotein3（DLL3）是結(jié)構(gòu)特殊的DSL家族成員，和其他DSL配體不一樣，它主要定位在高爾基體，只有在過表達時才會出現(xiàn)在細胞表面。這種獨特的定位方式使其區(qū)別于其他配體，影響其與受體的作用模式和信號傳導(dǎo)途徑。

       圖1 DLL 和 Notch 受體的結(jié)構(gòu)

       DLL3是Notch信號通路的一部分，Notch信號通路是一個復(fù)雜的細胞調(diào)控途徑。在正常細胞中，Notch受體與相鄰細胞表面的配體結(jié)合，導(dǎo)致正常的細胞過程。而在腫瘤細胞的多種生命活動中Notch信號通路發(fā)揮關(guān)鍵作用，DLL3作為該通路的重要組成部分，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

       DLL3的氨基酸序列

       圖2 DLL3的氨基酸序列

       DLL3在癌癥中的作用機制和角色

       Notch 通路

       Notch通路是一種高度保守的細胞信號通路，與惡性轉(zhuǎn)化、細胞增殖、周期停滯和細胞凋亡、上皮到間充質(zhì)轉(zhuǎn)化以及神經(jīng)內(nèi)分泌分化抑制有關(guān)。Notch信號通路包含四個受體（Notch1-4）、五個來自DSL家族的配體（DLL1、3、4和Jag1、2）以及非經(jīng)典配體DLL1同源物（DLK1）。DLL蛋白家族與細胞膜上Notch受體上的EGF重復(fù)序列相互作用，觸發(fā)Notch信號傳導(dǎo)。

       在經(jīng)典Notch信號傳導(dǎo)中，配體結(jié)合導(dǎo)致受體被金屬蛋白酶細胞內(nèi)切割，然后Notch胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)位到細胞核并調(diào)節(jié)Notch反應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄。這些基因在驅(qū)動腫瘤發(fā)生或抑制腫瘤中的特定作用取決于配體、細胞環(huán)境和腫瘤環(huán)境。

       圖3 DLL3 在 Notch 信號通路中的作用機制

       DLL3是Notch通路的抑制性配體

       DLL3作為Notch受體的抑制性配體發(fā)揮作用，已被證明與NEC/NET腫瘤發(fā)生有關(guān)。由于Notch激活與抑制的NE分化有關(guān)，因此通過DLL3的Notch沉默和降解似乎促進了各種腫瘤中的NE表型轉(zhuǎn)換。在胸腺細胞中，DLL3對Notch信號的抑制作用有助于增強陽性選擇過程?？傮w而言，DLL3被認為是Notch信號的抑制劑，這使得它成為治療Notch活性異常相關(guān)癌癥的重要靶點。

       圖4 DLL3 在惡性腫瘤中的表達和治療潛力

       DLL3 的表達和功能

       DLL3 在NEN中的表達

       圖5 DLL3 在NEN中的表達

       DLL3的功能

       表1 DLL3 在腫瘤細胞中的分布和功能

       DLL3作為Notch受體的抑制性配體，它不能直接結(jié)合Notch受體激活信號通路，而是通過順式作用使Notch信號失活，當以反式形式存在時，它不會結(jié)合或激活Notch受體。具體來說，DLL3能夠通過細胞內(nèi)保留機制，阻止Notch和（或）DLL1在細胞表面定位，進而抑制Notch信號傳導(dǎo)。

       DLL3是轉(zhuǎn)錄因子ASCL1的直接下游靶點，而ASCL1與肺神經(jīng)內(nèi)分泌細胞的發(fā)育相關(guān)。這一關(guān)系提示DLL3可能和神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的發(fā)生存在聯(lián)系，特別是在肺癌方面。在SCLC中，DLL3過表達可促進腫瘤細胞增殖、遷移和侵襲，通過調(diào)節(jié)Snail信號通路發(fā)揮作用；在其他NENs中，如LCNEC、MTC、宮頸NECs、GEP-NENs、膀胱NENs、NEPC和MCC等，DLL3表達與腫瘤特征和預(yù)后相關(guān)。在非NENs中，DLL3也有不同作用，如在乳腺癌中與不良預(yù)后和免疫細胞浸潤有關(guān)。

       圖6 Notch 信號通路在 SCLC 中的作用

       DLL3在癌癥免疫治療中的應(yīng)用

       圖7 靶向DLL3的免疫治療策略

       ADC（如Rova-T）

       Rova-T由人源化抗DLL3抗體與細胞毒性藥物連接而成，是首個針對DLL3的ADC。在SCLC臨床試驗中，雖有一定療效，但III期試驗因療效不佳和毒性問題終止，不過為后續(xù)研究提供了經(jīng)驗。其與免疫治療藥物聯(lián)合使用可降低毒性并增強療效。

       圖8 靶向 DLL3 的 ADC 的作用機制

       BiTEs（如tarlatamab）

       BiTEs能連接T細胞和腫瘤細胞，激活T細胞殺傷腫瘤。BI764532和Tarlatamab在SCLC及其他DLL3陽性NENs的臨床試驗中展現(xiàn)出有前景的療效和可接受的耐受性，HPN328在晚期DLL3表達腫瘤患者的試驗中顯示出初步的抗腫瘤活性和可管理的毒性。

       圖9 靶向 DLL3 的 BiTE

       CAR-T療法（如AMG119）

       AMG119對DLL3陽性SCLC細胞有強大細胞毒性，在體外和體內(nèi)研究中顯示出療效，I期研究評估了其安全性和抗腫瘤活性，顯示出一定安全性和療效。還有其他CAR-T候選療法及CAR-NK細胞療法處于研發(fā)階段。

       聯(lián)合免疫檢查點抑制劑

       DLL3靶向療法與免疫檢查點抑制劑聯(lián)合，理論上可形成正反饋增強療效，但在SCLC中，CAR-T細胞與免疫檢查點抑制劑聯(lián)合的效果存在不一致，多模式聯(lián)合治療或為優(yōu)化方向。

       表2 目前正在進行的靶向DLL3的研發(fā)藥物

       近紅外光免疫療法（NIR-PIT）

       NIR-PIT利用抗體-光吸收劑偶聯(lián)物，在近紅外光照射下破壞腫瘤細胞并誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，針對DLL3的NIR-PIT在臨床前研究中展現(xiàn)出抑制腫瘤生長的效果。但在人體中的可行性、安全性和耐受性尚待確定。

       圖10 DLL3 靶向近紅外光免疫療法的機制

       放射性藥物療法（RPT）

       Lu-177標記的抗DLL3單克隆抗體在腫瘤異種移植模型中顯示出療效和較低毒性。將抗DLL3抗體與放射性同位素結(jié)合，對DLL3表達的SCLC細胞有選擇性照射作用，臨床前研究效果良好，未來需優(yōu)化劑量等。

       DLL3在不同癌癥中的研究進展

       根據(jù)腫瘤類型和細胞生長環(huán)境的不同，DLL3的激活可以發(fā)揮促癌或抑癌作用。有報道，DLL3在小細胞肺癌、乳腺癌、垂體瘤、急性髓系白血病中有促癌作用，但在肝癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和惡性膠質(zhì)瘤中卻發(fā)揮了抑癌作用。

       神經(jīng)內(nèi)分泌癌（NEC）

       小細胞肺癌（SCLC）：它與腫瘤發(fā)生相關(guān)，通過調(diào)節(jié)SNAI1/Snail信號通路促進細胞增殖、遷移和侵襲，DLL3的表達與神經(jīng)內(nèi)分泌特征呈正相關(guān)，且與Notch家族基因的表達呈負相關(guān)。此外，它對患者預(yù)后的影響存在爭議。

       大細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌（LCNEC）：DLL3陽性與STK11/KEAP1突變相關(guān)，可作為預(yù)后不良和輔助化療敏感性的標志物。

       髓樣甲狀腺癌（MTC）：DLL3表達與間質(zhì)纖維化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，可用于識別侵襲性更強、易早期轉(zhuǎn)移的腫瘤。

       婦科癌癥：在子宮內(nèi)膜癌（EC）中，DLL3表達顯著上調(diào)，其過表達、腫瘤分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移都是獨立的預(yù)后預(yù)測因素。在卵巢癌（OC）中，DLL3等Notch信號通路相關(guān)基因的表達與不良總生存期相關(guān)，且隨著癌癥進展表達增加。宮頸NECs中，81%的患者有DLL3表達，轉(zhuǎn)移灶中表達更高且與PIK3CA、PTEN突變呈負相關(guān)。

       胃腸胰NECs（GEP-NENs）：DLL3在低分化NEC中高表達，且在ECC4、ECC10和ECC12細胞系中表達上調(diào)，與無進展生存期和總生存期較短相關(guān)。

       膀胱NEC：DLL3的表達與神經(jīng)內(nèi)分泌標志物正相關(guān)，高表達的DLL3蛋白與患者較短的總生存期和無進展生存期相關(guān)，并且在患者來源的異種移植模型中，針對DLL3的藥物展現(xiàn)出療效，提示DLL3可作為預(yù)后不良的生物標志物和潛在治療靶點。

       神經(jīng)內(nèi)分泌前列腺癌（NEPC）：DLL3的表達與侵襲性臨床行為相關(guān)，多數(shù)去勢抵抗性小細胞神經(jīng)內(nèi)分泌前列腺癌（CRPC-NE）和部分去勢抵抗性前列腺腺癌中存在DLL3表達，而局限性良性前列腺癌中則無。單劑量的抗DLL3人源化抗體SC16LD6.5可使表達DLL3的前列腺癌異種移植物產(chǎn)生完全且持久的反應(yīng)，說明DLL3是神經(jīng)內(nèi)分泌前列腺癌的潛在治療靶點。

       Merkel細胞癌（MCC）：多數(shù)患者DLL3陽性，但與總生存期無顯著關(guān)聯(lián)，目前還需要大量研究來確定DLL3能否作為Merkel細胞癌的預(yù)后生物標志物以及ROVA-T的療效。

       非神經(jīng)內(nèi)分泌（NE）腫瘤

       肝癌：DLL3過表達可誘導(dǎo)細胞凋亡，與在NENs中的作用不同，且其與乙肝病毒（HBV）相互作用，HBx蛋白可通過誘導(dǎo)表觀遺傳修飾沉默DLL3，進而促進癌變。

       胰腺癌：DLL3在癌細胞系中的表達是正常胰腺上皮細胞的3倍，抑制其表達可抑制癌細胞生長，且它與Notch1等表達呈正相關(guān)。

       膠質(zhì)瘤：DLL3表達與IDH突變型膠質(zhì)瘤相關(guān)，突變亞型中表達更高，不過其與患者生存期的關(guān)系存在爭議，有的研究表明高表達與較好預(yù)后相關(guān)，有的則顯示低表達患者生存期更短。

       乳腺癌：高表達的DLL3與患者低總生存期及較多的腫瘤浸潤免疫細胞（尤其是調(diào)節(jié)性T細胞）相關(guān)，提示其與不良預(yù)后有關(guān)，也為乳腺癌免疫治療提供了新方向。

       垂體腺瘤：生長激素分泌型垂體腺瘤中，EGFL7與DLL3相互作用并調(diào)節(jié)其信號傳導(dǎo)。EGFL7高表達與腫瘤侵襲性相關(guān)，敲低EGFL7可下調(diào)DLL3，表明EGFL7可能通過抑制DLL3表達成為新的治療靶點。

       表3 DSL家族的配體在癌癥中的作用

       DLL3靶向療法的未來展望

       DLL3在腫瘤進展中作用關(guān)鍵，但目前對其臨床應(yīng)用的理解存在局限。DLL3靶向藥物的療效和耐受性存在問題，缺乏標準化的DLL3表達評估方法。未來需深入了解DLL3生物學(xué)特性，整合前沿技術(shù)構(gòu)建全面的DLL3表達和功能模型。誘導(dǎo)多能干細胞來源的免疫細胞治療具有標準化、功能增強等優(yōu)勢，是潛在發(fā)展方向。未來需優(yōu)化ADC的有效載荷和連接子，開發(fā)創(chuàng)新藥物，并明確DLL3作為預(yù)測生物標志物的作用。此外，還需重新設(shè)計臨床試驗范式，促進跨學(xué)科合作，以推動DLL3靶向療法的發(fā)展。

       參考文獻

       1. Das S, Samaddar S. Recent Advances in the Clinical Translation of Small-Cell Lung Cancer Therapeutics. Cancers (Basel). 2025 Jan 14;17(2):255.

       2. Peddio A, Pietroluongo E, Lamia MR, Luciano A, Caltavituro A, Buonaiuto R, Pecoraro G, De Placido P,