贏在起點，CDE發(fā)布基因治療產品非臨床研究與評價要點

       為了規(guī)范基因治療產品的非臨床研究，統(tǒng)一評價標準，引導基因治療產品的研究與申報，提高企業(yè)研發(fā)效率，并與ICH相關指導原則工作同步，CDE通過前期調研、ICH S12《基因治療產品非臨床生物分布考慮》國內專家工作組起草、專家咨詢以及部門技術委員會討論，2021年12月3日，國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心官網(wǎng)正式發(fā)布《基因治療產品非臨床研究與評價技術指導原則（試行）》（成文時間2021年11月30日），自發(fā)布之日起實施。本文主要基于CDE《細胞治療產品研究與評價技術指導原則（試行）》、《當前對CAR-T類產品非臨床研究與評價的一些考慮》和《CAR-T細胞治療產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》，為大家梳理了本指導原則中關于基因治療產品非臨床研究與評價考慮關鍵內容并結合自己的解讀與大家分享。

       一、基因治療產品非臨床研究與評價研究挑戰(zhàn)

       隨著基因治療技術發(fā)展日新月異，基因治療取得了突破性進展，為難治性疾病提供了全新的治療理念和思路。有必要制定合適的指導原則規(guī)范和引導這一新興藥物產業(yè)的健康發(fā)展?；蛑委煯a品涉及的技術比較新穎，沒有積累傳統(tǒng)藥物一樣成熟的非臨床研究與評價的技術標準，存在較大的不確定性，ICH組織也開始協(xié)調基因治療領域的國際注冊技術要求。CDE基于行業(yè)發(fā)展和監(jiān)管的需要，制定本指導原則，以明確基因治療產品非臨床研究內容，統(tǒng)一評價標準，提高研發(fā)效率，同時積累基因治療產品研發(fā)和監(jiān)管經驗，更好更有效地參與ICH基因治療指導原則制定工作，建立協(xié)調一致的國際行業(yè)標準。

       二、基因治療產品非臨床研究主要內容

       基于目前的認知，與常規(guī)的非臨床研究一樣，基因治療產品的非臨床研究建議遵循3R原則（替代/減少/優(yōu)化），以避免不必要的動物及其它資源的使用?；蛑委煯a品與傳統(tǒng)藥物相比，非臨床研究與評價存在諸多差異，目前非臨床評價較大程度依賴于動物疾病模型，但是人員細胞對于動物而言就屬于異源性，從動物的反應來推斷人體的反應，不夠準確，由于基因治療產品種類、作用機制、作用特點、給藥途徑、安全性風險等方面的差異，應基于風險分析設計并開展非臨床研究，綜合評估臨床試驗受試者潛在風險-獲益，隨著技術的不斷完善，CDE制定《基因治療產品非臨床研究與評價技術指導原則（試行）》，為基因治療產品非臨床研究設計提供建議，并作為非臨床評價的參考以支持開展相應的臨床試驗?；蛑委煯a品非臨床研究為臨床試驗提供支持性信息，研究內容一般為藥理學、藥代動力學、毒理學。

       1、適用范圍

       2、基因治療產品非臨床研究——藥理學主要內容

       基因治療產品藥理學研究是為了在體內、體外研究產品與治療靶點相關的作用機制和效應，明確基因治療產品的生物學作用特點，應選擇合適的體內或體外模型進行，并以此評價基因治療產品在人體中潛在治療作用和效果，有助于后續(xù)非臨床和臨床試驗的劑量選擇。

       2.1 如何選擇藥效學評價研究的動物模型？

       動物疾病/損傷模型可能相對正常健康動物模型更加適于評價“風險-獲益”關系，更有機會發(fā)現(xiàn)可以用于臨床試驗監(jiān)測的活性/**生物標志物。選擇動物模型時應考慮以下因素：

       (1)受試物在動物模型中復制能力和轉導（轉染、感染）特性；

       (2)動物模型中與受試物相關的細胞/受體表達和組織分布；

       (3)受試物中生物調節(jié)活性的組分對動物模型轉基因的表達水平和組織表達特異性的影響；

       (4)受試物導入基因產物引起的生物學效應；

       (5)動物預存免疫學狀態(tài)對受試物的影響；

       (6)動物模型內在的與導入基因同源的基因及其產物對藥效的影響；

       (7)轉基因動物用于特定受試物藥效評價的適用性；

       (8)動物模型實際可行的安全劑量和體積；

       (9)受試物在動物模型中的生物分布特征等。

       注意事項：在選擇動物疾病/損傷模型時需要考慮其局限性，包括模型內在的固有變異、歷史/基線數(shù)據(jù)不足、生理功能和解剖結構的技術性限制、模擬人體疾病/損傷病理過程的可靠性等。如果單個動物試驗模型不足以論證相關問題，則應采用多種動物模型開展相應研究，進行綜合分析評價。

       2.2 藥效學研究如何進行試驗設計？

       (1)概念驗證研究（POC）：

       為臨床試驗提供可行性和有效性的非臨床證據(jù)，并提供可能的生物學作用機制、潛在的安全性問題等信息，包括體外研究和體內研究。

       (2)安全藥理學研究：

       是研究受試物在治療劑量范圍內或治療范圍以上劑量時，對生理功能潛在的非期望作用，一般包括對中樞神經系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)的影響，通常應在臨床試驗前完成。采用基于風險的評價策略開展基因治療產品的安全藥理學試驗，考慮因素一般包括：導入基因作用機制、載體類型、生物分布、給藥途徑和臨床給藥方案等。安全藥理學試驗通常采用單次給藥方式，其研究終點也可以納入到一般毒理學試驗中。

       3、基因治療產品非臨床研究——藥代動力學主要內容

       3.1 藥代動力學研究如何進行試驗設計？

       (1)暴露量：根據(jù)產品具體特點考慮非臨床研究中的實際暴露情況。

       (2)生物分布：生物分布是受試物在相關動物種屬中給藥部位、靶組織和非靶組織包括體液（例如血液、腦脊液、玻璃體液）在內的體內分布、存續(xù)和清除。如采用足夠的劑量，以臨床擬用的給藥途徑，在相關動物種屬或動物模型中開展，不僅包括導入基因的檢測，還可能包括導入基因表達產物、載體的檢測等。

       (3)脫落：指基因治療產品通過排泄物（尿液、糞便）、分泌物（唾液、鼻咽液等）或皮膚（膿皰、瘡、傷口）排出體外。如根據(jù)復制型基因治療產品的特點評估開展脫落分析的必要性。

       4、基因治療產品非臨床研究——毒理學研究主要內容

       4.1 一般毒理學試驗設計的考慮要點？

       (1)動物種屬選擇：所選動物種屬應與基因治療產品具有良好的生物學相關性，采用相關動物種屬開展試驗。

       (2)劑量設計：給藥劑量應該包括在最合適的非臨床藥效模型中確定的藥效劑量范圍或擬推薦的臨床劑量范圍。最高劑量一般期望獲得明顯**反應的相關信息，通常為藥效學最高劑量的一定倍數(shù)或擬推薦臨床最高劑量的一定倍數(shù)。

       (3)分組：設低、中、高3個劑量組，以及合適的對照組，例如溶媒、輔料、空載體、含有非功能轉基因的載體等對照組。

       (4)給藥方案：應最 大程度地模擬臨床擬用給藥方案，給藥途徑、給藥頻率和給藥期限應能適當反映臨床使用情況。對于臨床研究擬單次給藥的基因治療產品，可開展擴展的單次給藥或重復給藥**試驗；對于臨床研究擬多次給藥的基因治療產品，應進行重復給藥**試驗，給藥次數(shù)和給藥頻率一般不應低于臨床給藥次數(shù)和頻率。

       (5)試驗期限：通常會長于其它生物制品的標準**試驗持續(xù)時間，應包括多個解剖時間點（至少應包括導入基因峰值時間點、穩(wěn)態(tài)時間點等），以便評價基因治療產品發(fā)揮作用的持續(xù)性，以及劑量/暴露量與**反應、生物分布與**反應的關系。

       (6)檢測指標：除常規(guī)觀察指標外，一般毒理學試驗需結合基因治療產品特性，考慮增加合適的觀察指標，如生物活性細胞因子分泌、異常/異位增生性病變、免疫原性/免疫**等。

       4.2 免疫原性和免疫**研究如何進行？

       免疫原性可能來源于產品中的非人源化組分、導入基因的表達產物、載體、基因編輯產生的非預期的肽/蛋白質等。病毒載體類基因治療產品相對更容易產生免疫原性。此外，還應考慮實驗動物預存免疫對試驗的影響；已知對免疫系統(tǒng)有影響的基因治療產品，如編碼生長因子、細胞因子等的產品，通常需要開展免疫**研究，應包括體液和/或細胞免疫終點評價。

       4.3 生殖**研究如何進行？

       通常需要開展胚胎-胎仔發(fā)育**和圍產期**研究，除非有基于具體產品類型的特殊考慮并具有科學合理性。如果基因治療產品擬用于有生育可能或妊娠人群，應研究產品對胎兒的影響（例如細胞因子局部生成后通過胎盤轉運），開展胚胎-胎仔發(fā)育和圍產期**試驗。如果在一般毒理學試驗中發(fā)現(xiàn)有潛在的生殖器官**反應，應開展生育力和早期胚胎發(fā)育**試驗。

       4.4 遺傳**研究考慮要點？

       目前對于判斷細胞基因組插入/修飾是否會產生遺傳**、是否最終會發(fā)生癌變依然還缺乏系統(tǒng)的認知，需要分析基因組改變（載體或遺傳物質整合進基因組、對基因組編輯等）的特征，并評估相關潛在風險。

       通常不需要進行標準的遺傳**組合試驗，但應根據(jù)基因治療產品的特點、產品的具體適應癥、載體的已有信息、導入基因序列結構等，評估基因治療產品整合進基因組的可能性，判斷是否需要開展另外的遺傳**研究。

       基因修飾噬菌體、細菌和真菌相關的產品可以不進行遺傳**研究，一般認為這些產品通常不會直接與宿主細胞基因組發(fā)生相互作用。

       4.5 致癌性研究考慮要點？

       標準的嚙齒類動物致癌性試驗一般不適用于評價基因治療產品。可采用證據(jù)權重（7WoE）方法來評估致癌性風險，必要時進行致癌性研究。

       4.6 復制型病毒風險考慮要點？

       采用復制缺陷病毒載體的基因治療產品，需要評估在生產的過程中是否有可能產生復制型病毒，應考慮到該病毒在不同物種之間的流行性以及傳播性。

       4.7局部耐受性考慮要點？

       根據(jù)產品類型、給藥途徑和臨床試驗方案，某些基因治療產品（例如眼內給藥、肌肉注射、瘤內給藥等）應開展局部耐受性試驗，適當時可以結合在一般毒理學試驗中進行。

       參考文獻

       [1]www.cde.org.cn.